Protéin DELLA anu dilestarikan masterrégulator tumuwuhnu maénkeun peran sentral dina ngadalikeun ngembangkeun tutuwuhan dina respon kana cues internal tur lingkungan. DELLA tindakan minangka régulator transkripsional sareng direkrut pikeun nargétkeun promotor ku cara ngabeungkeut faktor transkripsi (TFs) sareng histone H2A ngaliwatan domain GRAS na. Panaliti anyar nunjukkeun yén stabilitas DELLA diatur sacara post-translationally ngaliwatan dua mékanisme: polyubiquitination ngainduksi ku phytohormone gibberellin, anu nyababkeun degradasi gancangna, sareng konjugasi tina modifiers sapertos ubiquitin leutik (SUMO) pikeun ningkatkeun akumulasi. Salaku tambahan, kagiatan DELLA sacara dinamis diatur ku dua glikosilasi anu béda: interaksi DELLA-TF ditingkatkeun ku O-fucosylation tapi dihambat ku modifikasi N-acetylglucosamine (O-GlcNAc). Sanajan kitu, peran fosforilasi DELLA tetep can écés, sabab studi saméméhna geus ditémbongkeun hasil conflicting, mimitian ti nu némbongkeun yén fosforilasi promotes atawa ngurangan degradasi DELLA ka batur némbongkeun yén fosforilasi teu mangaruhan stabilitas na. Di dieu, urang ngaidentipikasi situs fosforilasi di REPRESSORga1-3(RGA, AtDELLA) dimurnikeun tina Arabidopsis thaliana ku analisa spéktrometri massa sareng nunjukkeun yén fosforilasi dua péptida RGA di daérah PolyS sareng PolyS / T ngamajukeun beungkeutan H2A sareng ningkatkeun kagiatan RGA. Asosiasi RGA kalawan target promoters. Utamana, fosforilasi henteu mangaruhan interaksi RGA-TF atanapi stabilitas RGA. Ulikan kami ngungkabkeun mékanisme molekular dimana fosforilasi nyababkeun kagiatan DELLA.
Pikeun ngajelaskeun peran fosforilasi dina ngatur fungsi DELLA, penting pikeun ngaidentipikasi situs fosforilasi DELLA dina vivo sareng ngalaksanakeun analisa fungsional dina pepelakan. Ku purifikasi pangirut ekstrak tutuwuhan dituturkeun ku MS / MS analisis, urang ngaidentipikasi sababaraha fosfosit dina RGA. Dina kaayaan kakurangan GA, fosforilasi RHA ningkat, tapi fosforilasi henteu mangaruhan stabilitasna. Anu penting, co-IP sareng ChIP-qPCR assays ngungkabkeun yén fosforilasi di daérah PolyS / T RGA ngamajukeun interaksina sareng H2A sareng pakaitna sareng promotor target, ngungkabkeun mékanisme dimana fosforilasi ngainduksi fungsi RGA.
RGA direkrut pikeun nargétkeun kromatin ngaliwatan interaksi subdomain LHR1 sareng TF teras ngiket ka H2A ngalangkungan wilayah PolyS / T sareng subdomain PFYRE, ngabentuk kompleks H2A-RGA-TF pikeun nyaimbangkeun RGA. Fosforilasi Pep 2 di daérah PolyS / T antara domain DELLA sareng domain GRAS ku kinase anu teu dipikanyaho ningkatkeun beungkeutan RGA-H2A. Protéin mutan rgam2A ngaleungitkeun fosforilasi RGA sareng ngadopsi konformasi protéin anu béda pikeun ngaganggu beungkeutan H2A. Ieu nyababkeun destabilisasi interaksi TF-rgam2A sementara sareng disosiasi rgam2A tina kromatin target. Angka ieu ngan ukur ngagambarkeun réprési transkripsi anu dimédiasi RGA. Pola anu sami tiasa dijelaskeun pikeun aktivasina transkripsi anu dimédiasi RGA, kecuali kompleks H2A-RGA-TF bakal ngamajukeun transkripsi gen target sareng dephosphorylation of rgam2A bakal ngirangan transkripsi. Gambar dirobah tina Huang et al.21.
Sadaya data kuantitatif dianalisis sacara statistik ngagunakeun Excel, sareng béda anu signifikan ditangtukeun ngagunakeun uji t Student. Taya métode statistik dipaké pikeun preliminarily nangtukeun ukuran sampel. Taya data anu kaasup ti analisis; percobaan teu randomized; panalungtik henteu buta kana distribusi data nalika ékspérimén sareng évaluasi hasil. Ukuran sampel dituduhkeun dina legenda inohong jeung file data sumber.
Kanggo inpo nu langkung lengkep ihwal desain ulikan, tingali Laporan Portopolio Alam Abstrak pakait sareng artikel ieu.
Data proteomik spéktrométri massa geus disumbangkeun ka konsorsium ProteomeXchange ngaliwatan gudang pasangan PRIDE66 kalawan identifier dataset PXD046004. Sadaya data anu diala salami ulikan ieu dibere dina Émbaran Suplemén, File Data Suplemén, sareng File Data Atah. Sumber data disadiakeun pikeun artikel ieu.
waktos pos: Nov-08-2024