Hatur nuhun pikeun ngadatangan Nature.com.Versi browser anu anjeun anggo gaduh dukungan CSS kawates.Pikeun hasil nu pangsaena, kami nyarankeun Anjeun make versi anyar tina panyungsi anjeun (atawa nonaktipkeun Mode kasaluyuan dina Internet Explorer).Samentara éta, pikeun mastikeun rojongan lumangsung, kami némbongkeun situs tanpa styling atanapi JavaScript.
Kombinasi sanyawa inséktisida turunan tutuwuhan tiasa nunjukkeun interaksi sinergis atanapi antagonis ngalawan hama.Kusabab panyebaran gancang panyakit anu dibawa ku reungit Aedes sareng ningkatna résistansi populasi reungit Aedes ka inséktisida tradisional, dua puluh dalapan kombinasi sanyawa terpene dumasar kana minyak atsiri tutuwuhan dirumuskeun sareng diuji ngalawan tahap larva sareng dewasa Aedes aegypti.Lima minyak atsiri tutuwuhan (EOs) mimitina dievaluasi pikeun efficacy larvicidal jeung dewasa-pamakéan maranéhanana, sarta dua sanyawa utama dicirikeun dina unggal EO dumasar kana hasil GC-MS.Senyawa anu diidentifikasi utama anu dibeuli, nyaéta diallyl disulfide, diallyl trisulfide, carvone, limonene, eugenol, methyl eugenol, eucalyptol, eudesmol and reungit alpha-pinene.Kombinasi binér sanyawa ieu lajeng disiapkeun ngagunakeun dosis subléthal sarta épék sinergis jeung antagonis maranéhanana diuji sarta ditangtukeun.Komposisi larvicidal pangsaéna dicandak ku nyampur limonene sareng disulfida diallyl, sareng komposisi adulticidal pangsaéna dicandak ku cara nyampur carvone sareng limonene.Larvicide sintétik nu dipaké komersil Temphos jeung ubar malathion déwasa diuji misah tur dina kombinasi binér jeung terpenoids.Hasilna nunjukkeun yén kombinasi temephos sareng diallyl disulfide sareng malathion sareng eudesmol mangrupikeun kombinasi anu paling efektif.Kombinasi anu kuat ieu tiasa dianggo ngalawan Aedes aegypti.
Minyak atsiri tutuwuhan (EOs) nyaéta métabolit sékundér anu ngandung rupa-rupa sanyawa bioaktif sareng janten langkung penting salaku alternatif pikeun péstisida sintétik.Henteu ngan ukur ramah lingkungan sareng ramah-pamaké, tapi ogé campuran sanyawa bioaktif anu béda, anu ogé ngirangan kamungkinan ngembangkeun résistansi narkoba1.Ngagunakeun téknologi GC-MS, panalungtik nalungtik konstituén tina rupa-rupa minyak atsiri tutuwuhan jeung ngaidentipikasi leuwih ti 3.000 sanyawa ti 17.500 tutuwuhan aromatik2, lolobana nu diuji pikeun sipat inséktisida sarta dilaporkeun mibanda épék inséktisida3,4.Sababaraha panilitian nunjukkeun yén karacunan komponén utama sanyawa sami atanapi langkung ageung tibatan étiléna oksida atah na.Tapi pamakéan sanyawa individu deui bisa ninggalkeun rohangan pikeun ngembangkeun lalawanan, sakumaha dina kasus inséktisida kimia5,6.Ku alatan éta, fokus ayeuna nyaéta nyiapkeun campuran sanyawa dumasar étiléna oksida pikeun ningkatkeun éféktivitas inséktisida sareng ngirangan kamungkinan résistansi dina populasi hama sasaran.Sanyawa aktif individu anu aya dina EO tiasa nunjukkeun épék sinergis atanapi antagonis dina kombinasi anu ngagambarkeun kagiatan sakabéh EO, kanyataan anu parantos ditekenkeun dina studi anu dilakukeun ku panalungtik saméméhna7,8.Program kontrol vektor ogé kalebet EO sareng komponenana.Aktivitas reungit minyak atsiri parantos diulik sacara éksténsif dina reungit Culex sareng Anopheles.Sababaraha studi geus nyoba ngamekarkeun péstisida éféktif ku ngagabungkeun rupa tutuwuhan jeung péstisida sintétik dipaké komersil pikeun ngaronjatkeun karacunan sakabéh jeung ngaleutikan efek samping9.Tapi studi sanyawa sapertos ngalawan Aedes aegypti tetep jarang.Kamajuan élmu médis sareng pamekaran obat-obatan sareng vaksin parantos ngabantosan merangan sababaraha panyakit anu disababkeun ku vektor.Tapi ayana serotipe virus anu béda, anu dikirimkeun ku reungit Aedes aegypti, nyababkeun gagalna program vaksinasi.Ku alatan éta, nalika panyakit sapertos kitu kajantenan, program kontrol vektor mangrupikeun hiji-hijina pilihan pikeun nyegah panyebaran panyakit.Dina skenario ayeuna, kontrol Aedes aegypti pohara penting sabab mangrupakeun vektor konci rupa-rupa virus jeung serotipe maranéhanana ngabalukarkeun demam berdarah, Zika, demam berdarah dengue, muriang konéng, jsb Hal paling noteworthy nyaéta kanyataan yén jumlah Kasus ampir sadaya panyakit anu ditularkeun ku véktor Aedes ningkat unggal taun di Mesir sareng ningkat di sakuliah dunya.Ku alatan éta, dina kontéks ieu, aya kabutuhan urgent pikeun ngembangkeun ukuran kontrol ramah lingkungan tur éféktif pikeun populasi Aedes aegypti.Calon poténsial dina hal ieu nyaéta EO, sanyawa konstituénna, sareng kombinasina.Ku alatan éta, ulikan ieu nyoba ngaidentipikasi kombinasi sinergis éféktif tina sanyawa EO tutuwuhan konci tina lima tutuwuhan mibanda sipat inséktisida (ie, mint, Basil suci, Eucalyptus spotted, Allium walirang jeung melaleuca) ngalawan Aedes aegypti.
Kabéh EOs dipilih nunjukkeun poténsi aktivitas larvicidal ngalawan Aedes aegypti kalawan 24-jam LC50 mimitian ti 0,42 nepi ka 163,65 ppm.Aktivitas larvicidal pangluhurna kacatet pikeun peppermint (Mp) EO kalayan nilai LC50 0,42 ppm dina 24 jam, dituturkeun ku bawang bodas (As) kalayan nilai LC50 16,19 ppm dina 24 jam (Tabel 1).
Kacuali Ocimum Sainttum, Os EO, sadaya opat EO anu disaring sanésna nunjukkeun épék alérgi, kalayan nilai LC50 mimitian ti 23,37 dugi ka 120,16 ppm salami periode paparan 24 jam.Thymophilus striata (Cl) EO paling efektif pikeun maéhan déwasa kalayan nilai LC50 23.37 ppm dina 24 jam paparan, dituturkeun ku Eucalyptus maculata (Em) anu ngagaduhan nilai LC50 101.91 ppm (Tabel 1).Di sisi anu sanés, nilai LC50 pikeun Os henteu acan ditangtukeun salaku tingkat kematian pangluhurna 53% kacatet dina dosis pangluhurna (Suplemén Gambar 3).
Dua sanyawa konstituén utama dina unggal EO diidentifikasi sareng dipilih dumasar kana hasil database perpustakaan NIST, persentase luas kromatogram GC, sareng hasil spéktra MS (Tabel 2).Pikeun EO As, sanyawa utama anu diidentifikasi nyaéta diallyl disulfide sareng diallyl trisulfide;pikeun EO Mp sanyawa utama anu diidentifikasi nyaéta carvone sareng limonene, pikeun EO Em sanyawa utama anu diidentifikasi nyaéta eudesmol sareng eucalyptol;Pikeun EO Os, sanyawa utama anu diidentifikasi nyaéta eugenol sareng métil eugenol, sareng pikeun EO Cl, sanyawa utama anu diidentifikasi nyaéta eugenol sareng α-pinene (Gambar 1, Gambar Tambahan 5-8, Tabel Tambahan 1-5).
Hasil spéktrometri massa terpénoid utama minyak atsiri anu dipilih (A-diallyl disulfide; B-diallyl trisulfide; C-eugenol; D-métil eugenol; E-limonene; F-aromatic ceperone; G-α-pinene; H-cineole R-eudamol).
Jumlahna aya salapan sanyawa (diallyl disulfide, diallyl trisulfide, eugenol, methyl eugenol, carvone, limonene, eucalyptol, eudesmol, α-pinene) diidentifikasi minangka sanyawa mujarab anu mangrupakeun komponén utama EO sarta bioassayed individual ngalawan Aedes aegypti di larva. tahapan..Sanyawa eudesmol miboga aktivitas larvicidal pangluhurna kalawan nilai LC50 2,25 ppm sanggeus 24 jam paparan.Sanyawa diallyl disulfide jeung diallyl trisulfide ogé geus kapanggih boga épék larvicidal poténsial, kalawan rata-rata dosis sublethal dina rentang 10-20 ppm.Aktivitas larvicidal sedeng dititénan deui pikeun sanyawa eugenol, limonene sareng eucalyptol kalayan nilai LC50 63,35 ppm, 139,29 ppm.sareng 181,33 ppm saatos 24 jam, masing-masing (Table 3).Sanajan kitu, euweuh poténsi larvicidal signifikan tina métil eugenol jeung carvone kapanggih sanajan dina dosis pangluhurna, jadi nilai LC50 teu diitung (Table 3).Larvicide sintétik Temephos miboga konsentrasi bisa nepi ka tiwasna rata-rata 0,43 ppm ngalawan Aedes aegypti leuwih 24 jam paparan (Tabel 3, Tambahan Table 6).
Tujuh sanyawa (diallyl disulfide, diallyl trisulfide, eucalyptol, α-pinene, eudesmol, limonene jeung carvone) diidentifikasi minangka sanyawa utama EO éféktif sarta diuji individual ngalawan reungit Aedes Mesir dewasa.Numutkeun kana analisa régrési Probit, Eudesmol kapanggih gaduh poténsi pangluhurna kalayan nilai LC50 1,82 ppm, dituturkeun ku Eucalyptol kalayan nilai LC50 17,60 ppm dina waktos paparan 24 jam.Lima sanyawa sésana diuji éta moderately ngabahayakeun pikeun déwasa kalawan LC50s mimitian ti 140.79 mun 737.01 ppm (Table 3).Malathion organophosphorus sintétik kirang kuat tibatan eudesmol sareng langkung luhur tibatan genep sanyawa sanés, kalayan nilai LC50 5.44 ppm salami periode paparan 24-jam (Tabel 3, Tabel Tambahan 6).
Tujuh sanyawa timbal potent jeung organophosphorus tamephosate dipilih pikeun ngarumuskeun kombinasi binér tina dosis LC50 maranéhanana dina nisbah 1:1.Jumlahna aya 28 kombinasi binér disusun sareng diuji pikeun éféktivitas larvasida ngalawan Aedes aegypti.Salapan kombinasi kapanggih sinergis, 14 kombinasi antagonis, jeung lima kombinasi teu larvicidal.Diantara kombinasi sinergis, kombinasi diallyl disulfide sareng temofol paling efektif, kalayan mortalitas 100% dititénan saatos 24 jam (Tabel 4).Nya kitu, campuran limonene jeung diallyl disulfide jeung eugenol jeung thymetphos némbongkeun poténsi alus kalawan mortality larva observasi tina 98,3% (Tabel 5).4 kombinasi sésana, nyaéta eudesmol plus eucalyptol, eudesmol plus limonene, eucalyptol plus alpha-pinene, alpha-pinene plus temephos, ogé némbongkeun efficacy larvicidal signifikan, kalawan tingkat mortality observasi ngaleuwihan 90%.Laju mortality ekspektasi ngadeukeutan 60-75%.(Tabel 4).Sanajan kitu, kombinasi limonene jeung α-pinene atawa kayu putih némbongkeun réaksi antagonis.Kitu ogé, campuran Temephos sareng eugenol atanapi eucalyptus atanapi eudesmol atanapi diallyl trisulfide parantos kapanggih gaduh épék antagonis.Kitu ogé, kombinasi diallyl disulfide sareng diallyl trisulfide sareng kombinasi salah sahiji sanyawa ieu sareng eudesmol atanapi eugenol mangrupikeun antagonis dina tindakan larvicidalna.Antagonisme ogé dilaporkeun ku kombinasi eudesmol sareng eugenol atanapi α-pinene.
Tina sakabéh 28 campuran binér diuji pikeun aktivitas asam dewasa, 7 kombinasi éta sinergis, 6 teu boga pangaruh, sarta 15 éta antagonis.Campuran eudesmol sareng kayu putih sareng limonene sareng carvone kapanggih langkung efektif tibatan kombinasi sinergis anu sanés, kalayan tingkat kematian dina jam 24 masing-masing 76% sareng 100% (Tabel 5).Malathion geus katalungtik némbongkeun éfék sinergis jeung sagala kombinasi sanyawa iwal limonene jeung diallyl trisulfide.Di sisi séjén, antagonisme geus kapanggih antara diallyl disulfide jeung diallyl trisulfide jeung kombinasi boh di antarana jeung kayu putih, atawa kayu putih, atawa carvone, atawa limonene.Nya kitu, kombinasi α-pinene sareng eudesmol atanapi limonene, eucalyptol sareng carvone atanapi limonene, sareng limonene sareng eudesmol atanapi malathion nunjukkeun épék larvicidal antagonis.Pikeun genep kombinasi sésana, teu aya béda anu signifikan antara mortality ekspektasi sarta observasi (Tabel 5).
Dumasar efek sinergis jeung dosis sublethal, karacunan larvicidal maranéhanana ngalawan sajumlah badag reungit Aedes aegypti ahirna dipilih sarta salajengna diuji.Hasilna nunjukkeun yén mortalitas larva anu dititénan ngagunakeun kombinasi binér eugenol-limonene, diallyl disulfide-limonene sareng diallyl disulfide-timephos masing-masing nyaéta 100%, sedengkeun mortalitas larva anu diperkirakeun nyaéta 76,48%, 72,16% sareng 63,4% masing-masing (Tabel 6)..Kombinasi limonene jeung eudesmol kawilang kurang éféktif, kalawan 88% mortality larva observasi dina periode paparan 24-jam (Tabel 6).Kasimpulanana, opat kombinasi binér anu dipilih ogé nunjukkeun épék larvicidal sinergis ngalawan Aedes aegypti nalika dilarapkeun dina skala ageung (Tabel 6).
Tilu kombinasi sinergis dipilih pikeun bioassay adultocidal pikeun ngadalikeun populasi badag Aedes aegypti sawawa.Pikeun milih kombinasi pikeun nguji koloni serangga ageung, urang mimiti difokuskeun dua kombinasi terpene sinergis pangsaéna, nyaéta carvone plus limonene sareng eucalyptol plus eudesmol.Kadua, kombinasi sinergis anu pangsaéna dipilih tina kombinasi malathion organofosfat sintétik sareng terpénoid.Kami yakin yén kombinasi malathion sareng eudesmol mangrupikeun kombinasi pangsaéna pikeun nguji koloni serangga ageung kusabab mortalitas anu paling luhur sareng nilai LC50 anu rendah pisan tina bahan calon.Malathion nunjukkeun sinergis dina kombinasi sareng α-pinene, diallyl disulfide, eucalyptus, carvone sareng eudesmol.Tapi lamun urang nempo nilai LC50, Eudesmol boga nilai panghandapna (2,25 ppm).Nilai LC50 anu diitung tina malathion, α-pinene, diallyl disulfide, eucalyptol sareng carvone nyaéta 5,4, 716,55, 166,02, 17,6 sareng 140,79 ppm.masing-masing.Nilai-nilai ieu nunjukkeun yén kombinasi malathion sareng eudesmol mangrupikeun kombinasi optimal dina hal dosis.Hasilna nunjukkeun yén kombinasi carvone plus limonene sareng eudesmol plus malathion ngagaduhan 100% mortality observasi dibandingkeun sareng mortality ekspektasi 61% ka 65%.Kombinasi anu sanés, eudesmol ditambah eucalyptol, nunjukkeun tingkat kematian 78,66% saatos 24 jam paparan, dibandingkeun sareng tingkat kematian anu diperkirakeun 60%.Katiluna kombinasi anu dipilih nunjukkeun épék sinergis sanajan diterapkeun dina skala ageung ngalawan Aedes aegypti dewasa (Tabel 6).
Dina panilitian ieu, EO tutuwuhan anu dipilih sapertos Mp, As, Os, Em sareng Cl nunjukkeun épék maot anu ngajangjikeun dina tahap larva sareng dewasa Aedes aegypti.Mp EO miboga aktivitas larvicidal pangluhurna kalawan nilai LC50 0,42 ppm, dituturkeun ku As, Os jeung Em EOs kalawan nilai LC50 kirang ti 50 ppm sanggeus 24 jam.Hasil ieu konsisten jeung studi saméméhna ngeunaan reungit jeung flies dipterous séjén10,11,12,13,14.Sanajan potency larvicidal Cl leuwih handap ti minyak atsiri séjén, kalawan nilai LC50 163,65 ppm sanggeus 24 jam, poténsi sawawa na pangluhurna kalawan nilai LC50 23,37 ppm sanggeus 24 jam.Mp, As jeung Em EOs ogé némbongkeun poténsi allercidal alus kalawan nilai LC50 dina rentang 100-120 ppm dina 24 h paparan, tapi éta rélatif leuwih handap efficacy larvicidal maranéhanana.Di sisi anu sanés, EO Os nunjukkeun pangaruh allercidal anu tiasa diabaikan sanajan dina dosis terapi anu paling luhur.Ku kituna, hasil nunjukkeun yén karacunan étiléna oksida pikeun tutuwuhan bisa rupa-rupa gumantung kana tahap ngembangkeun reungit15.Éta ogé gumantung kana laju penetrasi EOs kana awak serangga, interaksi maranéhanana jeung énzim target husus, sarta kapasitas detoksifikasi reungit dina unggal tahap developmental16.Sajumlah ageung panilitian nunjukkeun yén sanyawa komponén utama mangrupikeun faktor penting dina kagiatan biologis étiléna oksida, sabab éta nyababkeun mayoritas sanyawa total3,12,17,18.Ku alatan éta, urang dianggap dua sanyawa utama dina unggal EO.Dumasar kana hasil GC-MS, diallyl disulfide sareng diallyl trisulfide diidentifikasi minangka sanyawa utama EO As, anu konsisten sareng laporan saméméhna19,20,21.Sanajan laporan saméméhna nunjukkeun yén menthol éta salah sahiji sanyawa utama, carvone na limonene deui diidentifikasi minangka sanyawa utama Mp EO22,23.Profil komposisi Os EO némbongkeun yén eugenol jeung métil eugenol mangrupa sanyawa utama, nu sarupa jeung papanggihan panalungtik saméméhna16,24.Eucalyptol jeung eucalyptol geus dilaporkeun salaku sanyawa utama hadir dina minyak daun Em, nu konsisten jeung papanggihan sababaraha peneliti25,26 tapi sabalikna papanggihan Olalade et al.27.Dominasi cineole sareng α-pinene dititénan dina minyak atsiri melaleuca, anu sami sareng studi saméméhna28,29.Bedana intraspésifik dina komposisi sareng konsentrasi minyak atsiri anu diekstrak tina spésiés pepelakan anu sami di lokasi anu béda parantos dilaporkeun sareng ogé dititénan dina ulikan ieu, anu dipangaruhan ku kaayaan pertumbuhan pepelakan géografis, waktos panén, tahap kamekaran, atanapi umur pepelakan.penampilan chemotypes, jsb.22,30,31,32.Sanyawa konci anu diidentifikasi teras dipésér sareng diuji pikeun épék larvicidal sareng pangaruhna kana reungit Aedes aegypti dewasa.Hasilna nunjukkeun yén aktivitas larvicidal diallyl disulfide dibandingkeun sareng EO As atah.Tapi aktivitas diallyl trisulfide leuwih luhur batan EO As.Hasil ieu sami sareng anu dicandak ku Kimbaris et al.33 dina Culex Filipina.Sanajan kitu, dua sanyawa ieu teu némbongkeun aktivitas autocidal alus ngalawan reungit target, nu konsisten jeung hasil Plata-Rueda et al 34 on Tenebrio molitor.Os EO éféktif ngalawan tahap larva Aedes aegypti, tapi henteu ngalawan tahap dewasa.Eta geus ditetepkeun yén aktivitas larvicidal tina sanyawa individu utama leuwih handap ti éta Os EO atah.Ieu nunjukkeun peran pikeun sanyawa séjén sareng interaksina dina étiléna oksida atah.Métil eugenol nyalira gaduh aktivitas negligible, sedengkeun eugenol nyalira gaduh aktivitas larvicidal sedeng.kacindekan ieu confirms, di hiji sisi,35,36, sarta di sisi séjén, contradicts nu conclusions peneliti saméméhna37,38.Bédana dina gugus fungsi eugenol sareng métileugenol tiasa nyababkeun karacunan anu béda-béda pikeun serangga sasaran anu sami39.Limonene kapanggih boga aktivitas larvicidal sedeng, sedengkeun pangaruh carvone teu signifikan.Nya kitu, karacunan rélatif low of limonene ka serangga dewasa sarta karacunan tinggi carvone ngarojong hasil sababaraha studi saméméhna40 tapi contradict batur41.Ayana beungkeut ganda dina duanana posisi intrasiklik jeung exocyclic bisa ngaronjatkeun mangpaat sanyawa ieu salaku larvicides3,41, bari carvone, nu mangrupakeun keton kalawan alfa jeung béta karbon teu jenuh, bisa némbongkeun poténsi nu leuwih luhur pikeun karacunan di adults42.Tapi, karakteristik individu limonene sareng carvone langkung handap tina total EO Mp (Tabel 1, Tabel 3).Di antara terpenoid anu diuji, eudesmol kapanggih gaduh aktivitas larvicidal sareng déwasa anu paling ageung kalayan nilai LC50 di handap 2,5 ppm, janten sanyawa anu ngajangjikeun pikeun ngontrol reungit Aedes.Kinerjana langkung saé tibatan sadayana EO Em, sanaos ieu henteu saluyu sareng pamanggihan Cheng et al.40.Eudesmol mangrupikeun sesquiterpene sareng dua unit isoprena anu kirang volatile tibatan monoterpenes oksigén sapertos kayu putih sahingga gaduh poténsi anu langkung ageung salaku péstisida.Eucalyptol sorangan boga sawawa gede ti aktivitas larvicidal, sarta hasil tina studi saméméhna duanana ngarojong tur refute this37,43,44.Kagiatan nyalira ampir sarimbag jeung sakabéh EO Cl.Monoterpén bicyclic séjén, α-pinene, boga pangaruh sawawa dina Aedes aegypti ti batan éfék larvicidal, anu sabalikna tina pangaruh EO Cl pinuh.Kagiatan inséktisida sakabéh terpenoid dipangaruhan ku lipofilisitas, volatilitas, percabangan karbon, aréa proyéksi, luas permukaan, gugus fungsi jeung posisina45,46.Sanyawa ieu tiasa dianggo ku ngancurkeun akumulasi sél, ngahalangan kagiatan pernapasan, ngaganggu pangiriman impuls saraf, jsb. 47 Organofosfat Temephos sintétik kapanggih gaduh kagiatan larvicidal pangluhurna kalayan nilai LC50 0,43 ppm, anu konsisten sareng data Lek - Utala48.Aktivitas sawawa tina malathion organophosphorus sintétik dilaporkeun dina 5,44 ppm.Sanaos dua organofosfat ieu nunjukkeun réspon anu nguntungkeun ngalawan galur laboratorium Aedes aegypti, résistansi reungit ka sanyawa ieu parantos dilaporkeun di sababaraha tempat di dunya49.Tapi, henteu aya laporan anu sami ngeunaan kamekaran résistansi kana obat-obatan herbal50.Ku kituna, botani dianggap alternatif poténsial pikeun péstisida kimia dina program kontrol vektor.
Pangaruh larvicidal diuji dina 28 kombinasi binér (1:1) anu disusun tina terpenoid kuat sareng terpenoid sareng timétfos, sareng 9 kombinasi kapanggih sinergis, 14 antagonis sareng 5 antagonis.Taya pangaruh.Di sisi séjén, dina bioassay potency sawawa, 7 kombinasi kapanggih janten sinergis, 15 kombinasi éta antagonis, sarta 6 kombinasi dilaporkeun teu boga pangaruh.Alesan naha kombinasi tangtu ngahasilkeun éfék sinergis bisa jadi alatan sanyawa calon berinteraksi sakaligus dina jalur penting béda, atawa inhibisi sequential énzim konci béda tina jalur biologis nu tangtu51.Kombinasi limonene sareng diallyl disulfide, eucalyptus atanapi eugenol kapanggih sinergis dina aplikasi skala leutik sareng ageung (Tabel 6), sedengkeun kombinasina sareng eucalyptus atanapi α-pinene kapanggih gaduh épék antagonis dina larva.Rata-rata, limonene sigana sinergis anu saé, sigana kusabab ayana gugus métil, penetrasi anu saé kana stratum corneum, sareng mékanisme aksi anu béda52,53.Saméméhna geus dilaporkeun yén limonene bisa ngabalukarkeun éfék toksik ku nembus kutikula serangga (karacunan kontak), mangaruhan sistem pencernaan (antifeedant), atawa mangaruhan sistem engapan (aktivitas fumigasi), 54 sedengkeun phenylpropanoids kayaning eugenol bisa mangaruhan énzim métabolik 55. Ku alatan éta, kombinasi sanyawa sareng mékanisme aksi anu béda-béda tiasa ningkatkeun pangaruh maot tina campuran.Kayu putih kapanggih sinergis jeung diallyl disulfide, kayu putih atawa α-pinene, tapi kombinasi séjén kalawan sanyawa séjén éta boh non-larvicidal atawa antagonis.Panaliti awal nunjukkeun yén eucalyptol ngagaduhan kagiatan ngahambat acetylcholinesterase (AChE), ogé reséptor octaamine sareng GABA56.Kusabab monoterpene siklik, eucalyptol, eugenol, jeung sajabana tiasa gaduh mékanisme tindakan anu sami sareng kagiatan neurotoksikna, 57 ku kituna ngaminimalkeun épék gabunganna ku cara silih inhibisi.Kitu ogé, kombinasi Temephos jeung diallyl disulfide, α-pinene jeung limonene kapanggih jadi sinergis, ngarojong laporan saméméhna ngeunaan pangaruh sinergis antara produk herbal jeung organophosphates sintétik58.
Kombinasi eudesmol jeung eucalyptol kapanggih boga pangaruh sinergis dina tahap larva jeung déwasa Aedes aegypti, jigana alatan modus aksi maranéhanana béda alatan struktur kimia maranéhanana béda.Eudesmol (sesquiterpene) tiasa mangaruhan sistem pernapasan 59 sareng eucalyptol (monoterpene) tiasa mangaruhan acetylcholinesterase 60.Paparan babarengan bahan-bahan ka dua atanapi langkung situs target tiasa ningkatkeun pangaruh maot tina kombinasi éta.Dina bioassays zat sawawa, malathion kapanggih sinergis jeung carvone atawa kayu putih atawa kayu putih atawa diallyl disulfide atawa α-pinene, nunjukkeun yén éta téh sinergis jeung tambahan limonene jeung di.Calon allercide sinergis alus pikeun sakabéh portopolio sanyawa terpene, iwal allyl trisulfide.Thangam sareng Kathiresan61 ogé ngalaporkeun hasil anu sami tina pangaruh sinergis malathion sareng ekstrak herbal.Réspon sinergis ieu tiasa disababkeun ku épék toksik gabungan tina malathion sareng fitokimia dina énzim detoksifikasi serangga.Organofosfat sapertos malathion umumna ngahambat ésterase sitokrom P450 sareng monooksigénase62,63,64.Ku alatan éta, ngagabungkeun malathion sareng mékanisme aksi ieu sareng terpenes sareng mékanisme tindakan anu béda-béda tiasa ningkatkeun éfék tiwasna sadayana dina reungit.
Di sisi séjén, antagonis nunjukkeun yén sanyawa nu dipilih kurang aktip dina kombinasi ti unggal sanyawa nyalira.Alesan pikeun antagonisme dina sababaraha kombinasi bisa jadi yén hiji sanyawa ngarobah paripolah sanyawa séjén ku cara ngarobah laju nyerep, distribusi, métabolisme, atawa ékskrési.Panaliti awal nganggap ieu mangrupikeun panyabab antagonisme dina kombinasi narkoba.Molekul Mékanisme anu mungkin 65. Nya kitu, kamungkinan panyabab antagonisme tiasa aya hubunganana sareng mékanisme tindakan anu sami, kompetisi sanyawa konstituén pikeun reséptor atanapi situs target anu sami.Dina sababaraha kasus, inhibisi non-kompetitif protéin target ogé bisa lumangsung.Dina ulikan ieu, dua sanyawa organosulfur, diallyl disulfide jeung diallyl trisulfide, némbongkeun éfék antagonis, kamungkinan alatan kompetisi pikeun situs target sarua.Kitu ogé, dua sanyawa walirang ieu némbongkeun éfék antagonis sarta teu boga pangaruh lamun digabungkeun jeung eudesmol jeung α-pinene.Eudesmol sareng alfa-pinena sifatna siklik, sedengkeun diallyl disulfide sareng diallyl trisulfide sipatna alifatik.Dumasar kana struktur kimia, kombinasi sanyawa ieu kedah ningkatkeun aktivitas bisa nepi ka tiwasna sakabéh saprak situs target maranéhanana biasana béda34,47, tapi sacara ékspériméntal kami kapanggih antagonism, nu bisa jadi alatan peran sanyawa ieu dina sababaraha organisme kanyahoan in vivo.sistem salaku hasil tina interaksi.Nya kitu, kombinasi cineole na α-pinene dihasilkeun réspon antagonis, sanajan peneliti saméméhna ngalaporkeun yén dua sanyawa boga target béda tina action47,60.Kusabab duanana sanyawa mangrupakeun monoterpenes siklik, meureun aya sababaraha situs target umum nu bisa bersaing pikeun ngariung jeung pangaruh karacunan sakabéh tina pasangan combinatorial ditalungtik.
Dumasar kana nilai LC50 sareng mortalitas anu dititénan, dua kombinasi terpene sinergis pangsaéna dipilih, nyaéta pasangan carvone + limonene sareng eucalyptol + eudesmol, ogé malathion organophosphorus sintétik sareng terpenes.Kombinasi sinergis optimal tina sanyawa malathion + Eudesmol diuji dina bioassay inséktisida sawawa.Sasaran koloni serangga ageung pikeun ngonfirmasi naha kombinasi efektif ieu tiasa dianggo ngalawan sajumlah ageung individu dina rohangan paparan anu kawilang ageung.Sadaya kombinasi ieu nunjukkeun pangaruh sinergis ngalawan ngagimbung ageung serangga.Hasil anu sami dicandak pikeun kombinasi larvicidal sinergis optimal anu diuji ngalawan populasi ageung larva Aedes aegypti.Ku kituna, bisa disebutkeun yén kombinasi larvicidal jeung adulticidal sinergis éféktif tina sanyawa EO tutuwuhan mangrupakeun calon kuat ngalawan kimia sintétik aya sarta bisa salajengna dipaké pikeun ngadalikeun populasi Aedes aegypti.Kitu ogé, kombinasi éféktif larvicides sintétik atawa adulticides kalawan terpenes ogé bisa dipaké pikeun ngurangan dosis thymetphos atanapi malathion dikaluarkeun ka reungit.Kombinasi sinergis anu kuat ieu tiasa masihan solusi pikeun studi kahareup ngeunaan évolusi résistansi narkoba dina reungit Aedes.
Endog Aedes aegypti dikumpulkeun ti Pusat Panalungtikan Médis Daerah, Dibrugarh, Déwan Panaliti Médis India sareng dijaga dina suhu anu dikontrol (28 ± 1 °C) sareng kalembaban (85 ± 5%) di Jurusan Zoologi, Universitas Gauhati handapeun kaayaan di handap: Arivoli digambarkeun et al.Sanggeus menetas, larva dibéré kadaharan larva (bubuk biskuit anjing jeung ragi dina nisbah 3:1) jeung déwasa dibéré larutan glukosa 10%.Dimimitian dina dinten ka-3 saatos mecenghulna, reungit bikang sawawa diidinan nyeuseup getih beurit albino.Soak kertas saring dina cai dina gelas jeung nempatkeun eta dina kandang-peletakan endog.
Sampel tutuwuhan anu dipilih nyaéta daun eucalyptus (Myrtaceae), kemangi suci (Lamiaceae), mint (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) sareng umbi allium (Amaryllidaceae).Dikumpulkeun ti Guwahati sareng diidentipikasi ku Departemen Botani, Universitas Gauhati.Sampel tutuwuhan anu dikumpulkeun (500 g) dipanaskeun pikeun hidrodistilasi nganggo alat Clevenger salami 6 jam.EO nu sasari dikumpulkeun dina vials kaca beresih jeung disimpen dina 4 ° C pikeun ulikan salajengna.
Toksisitas larvisida ditalungtik ngagunakeun prosedur standar Organisasi Kaséhatan Dunia anu rada dirobah 67 .Paké DMSO salaku hiji émulsifier.Unggal konsentrasi EO mimitina diuji dina 100 jeung 1000 ppm, ngalaan 20 larva dina unggal ulangan.Dumasar kana hasil, kisaran konsentrasi diterapkeun sareng mortalitas kacatet tina 1 jam dugi ka 6 jam (dina interval 1 jam), sareng dina 24 jam, 48 jam sareng 72 jam saatos perlakuan.Konsentrasi sublethal (LC50) ditangtukeun saatos 24, 48 sareng 72 jam paparan.Unggal konsentrasi diuji dina rangkep tilu sareng hiji kontrol négatip (cai wungkul) sareng hiji kontrol positif (cai anu dirawat DMSO).Upami pupation lumangsung sareng langkung ti 10% larva kelompok kontrol maot, percobaan diulang deui.Upami tingkat mortalitas dina kelompok kontrol antara 5-10%, paké rumus koreksi Abbott 68.
Métode anu dijelaskeun ku Ramar et al.69 dipaké pikeun bioassay sawawa ngalawan Aedes aegypti ngagunakeun aseton salaku pangleyur.Unggal EO mimitina diuji ngalawan reungit dewasa Aedes aegypti dina konsentrasi 100 jeung 1000 ppm.Larapkeun 2 ml unggal solusi anu disiapkeun kana nomer Whatman.1 sapotong kertas saring (ukuran 12 x 15 cm2) sareng ngantepkeun aseton ngejat salami 10 menit.Kertas saringan anu diolah ngan ukur 2 ml aseton dianggo salaku kontrol.Saatos aseton ngejat, kertas saring anu dirawat sareng kertas saringan kontrol disimpen dina tabung silinder (jero 10 cm).Sapuluh reungit umur 3 dugi ka 4 dinten anu henteu nyoco getih ditransferkeun kana triplicates unggal konsentrasi.Dumasar kana hasil tés awal, rupa-rupa konsentrasi minyak anu dipilih diuji.Mortalitas kacatet dina 1 jam, 2 jam, 3 jam, 4 jam, 5 jam, 6 jam, 24 jam, 48 jam jeung 72 jam sanggeus reungit dileupaskeun.Itung nilai LC50 pikeun waktos paparan 24 jam, 48 jam sareng 72 jam.Lamun tingkat mortality tina loba kontrol ngaleuwihan 20%, malikan sakabéh tés.Kitu ogé, upami tingkat mortalitas dina kelompok kontrol langkung ageung ti 5%, saluyukeun hasil pikeun sampel anu dirawat nganggo rumus Abbott68.
Kromatografi gas (Agilent 7890A) sareng spéktrometri massa (Accu TOF GCv, Jeol) dilakukeun pikeun nganalisis sanyawa konstituén tina minyak atsiri anu dipilih.GC dilengkepan detektor FID sareng kolom kapilér (HP5-MS).Gas pamawa éta hélium, laju aliran éta 1 ml / mnt.Program GC nyetél Allium sativum ka 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M sareng Ocimum Sainttum ka 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 - 280, pikeun mint 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, pikeun kayu putih 20.60-1M-10-200-3M-30-280, jeung beureum Pikeun sarébu lapisan aranjeunna aranjeunna. 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
Sanyawa utama unggal EO diidentifikasi dumasar kana persentase aréa diitung tina kromatogram GC sareng hasil spéktrométri massa (dirujuk kana database standar NIST 70).
Dua sanyawa utama dina unggal EO dipilih dumasar kana hasil GC-MS sarta dibeuli ti Sigma-Aldrich dina purity 98-99% pikeun bioassays salajengna.Sanyawa anu diuji pikeun larvicidal jeung efficacy dewasa ngalawan Aedes aegypti sakumaha ditétélakeun di luhur.Larvicides sintétik anu paling sering dianggo tamephosate (Sigma Aldrich) sareng malathion ubar sawawa (Sigma Aldrich) dianalisis pikeun ngabandingkeun efektivitasna sareng sanyawa EO anu dipilih, nuturkeun prosedur anu sami.
Campuran binér tina sanyawa terpene sareng sanyawa terpene anu dipilih ditambah organofosfat komersial (tilephos sareng malathion) disiapkeun ku cara nyampur dosis LC50 unggal sanyawa calon dina rasio 1: 1.Kombinasi anu disiapkeun diuji dina tahap larva sareng dewasa Aedes aegypti sakumaha anu dijelaskeun di luhur.Unggal bioassay dilakukeun dina rangkep tilu pikeun unggal kombinasi sareng dina rangkep tilu pikeun sanyawa individu anu aya dina unggal kombinasi.Pupusna serangga sasaran kacatet saatos 24 jam.Ngitung laju mortality ekspektasi pikeun campuran binér ngagunakeun rumus ieu di handap.
dimana E = ekspektasi tingkat mortalitas reungit Aedes aegypti salaku respon kana kombinasi binér, nyaéta sambungan (A + B).
Pangaruh unggal campuran binér dilabélan salaku sinergis, antagonis, atawa euweuh pangaruh dumasar kana nilai χ2 diitung ku métode digambarkeun ku Pavla52.Itung nilai χ2 pikeun tiap kombinasi ngagunakeun rumus ieu di handap.
Pangaruh kombinasi diartikeun sinergis lamun nilai χ2 diitung leuwih gede ti nilai tabel pikeun darajat kabebasan pakait (95% interval kapercayaan) jeung lamun mortality observasi kapanggih ngaleuwihan mortality ekspektasi.Nya kitu, lamun nilai χ2 diitung keur kombinasi sagala ngaleuwihan nilai tabel kalawan sababaraha derajat kabebasan, tapi mortality observasi leuwih handap mortality ekspektasi, perlakuan dianggap antagonis.Tur upami dina kombinasi sagala nilai diitung χ2 kirang ti nilai tabel dina darajat kabebasan pakait, kombinasi dianggap euweuh pangaruh.
Tilu nepi ka opat kombinasi berpotensi sinergis (100 larva jeung 50 aktivitas serangga larvicidal jeung dewasa) dipilih pikeun nguji ngalawan sajumlah badag serangga.Dewasa) lumangsungna sakumaha di luhur.Marengan campuran, sanyawa individu anu aya dina campuran anu dipilih ogé diuji dina jumlah anu sarua larva Aedes aegypti sareng déwasa.Babandingan kombinasi nyaéta hiji bagian LC50 dosis hiji sanyawa calon jeung bagian LC50 dosis sanyawa konstituén séjén.Dina bioassay aktivitas sawawa, sanyawa dipilih anu leyur dina pangleyur acetone sarta dilarapkeun ka kertas filter dibungkus dina wadah plastik cylindrical 1300 cm3.Acetone ieu ngejat salila 10 menit jeung sawawa dileupaskeun.Nya kitu, dina bioassay larvicidal, dosis sanyawa calon LC50 munggaran leyur dina volume sarua DMSO lajeng dicampurkeun jeung 1 liter cai disimpen dina wadah plastik 1300 cc, sarta larva dileupaskeun.
Analisis probabilistik tina 71 data mortalitas anu kacatet dilaksanakeun nganggo SPSS (versi 16) sareng software Minitab pikeun ngitung nilai LC50.
waktos pos: Jul-01-2024